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L'histoire tourne autour des expériences de Yuki Cross et Zero Kiryu en tant que membres du comité de discipline de l'Académie Cross. L'Académie comprend une Day Class et une Night Class, cette dernière étant en réalité composée d'élèves vampires dirigés par le vampire de sang pur Kaname Kuran. Yuki a été sauvée par Kaname dans son enfance et, dix ans plus tard, veille avec Zero sur le secret de l'académie, tout en étant impliquée dans la cohabitation entre vampires et humains, les complots des sang-purs et la crise de Zero qui sombre peu à peu après avoir été mordu par Shizuka Hio.